Komplement-fixációs reakció (CBC)

A komplement-fixációs reakciót (CSC) két fázisba soroljuk: az első fázisban az antigént a teszt szérummal kombináljuk, amelyben feltételezzük az antitestek felvételét és a komplement hozzáadását, 30 percig termosztátban inkubáljuk.

Második fázis: adjuk hozzá a hemolitikus rendszert (juh vörösvértestek + hemolitikus szérum). 30 percig tartó termosztátban történő inkubálás után vegye figyelembe az eredményt.

Pozitív CSC esetén a szérum antitestek az antigénnel kombinálva immun komplexet képeznek, amely komplementert köt magához, és a hemolízis nem fog bekövetkezni. Ha a reakció negatív (a teszt szérumban nincsenek antitestek), akkor a komplement szabad marad és hemolízis lép fel.

Az RSK-t a szifilisz, a gonorrhoea, a tífusz és más betegségek szerológiai diagnosztizálására használják.

A jelzett antigéneket és antitesteket alkalmazó immunitási reakciók azon a tényen alapulnak, hogy a reakcióban részt vevő egyik alkotóelemet (antigének vagy antitestek) kombinálják egy könnyen detektálható jelöléssel. Fluorokrómokat (RIF), enzimeket (ELISA), radioizotópokat (RIA), elektron-sűrű vegyületeket (IEM) használunk jelölésként..

Az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálatot (ELISA), a többi immunreakcióhoz hasonlóan, az alábbiak szerint alkalmazzuk: 1) ismeretlen antigén meghatározására ismert antitestek alkalmazásával vagy 2) antitestek kimutatására a vérszérumban ismert antigén alkalmazásával. A reakció sajátossága, hogy a reakció ismert összetevőjét egy enzimmel (például peroxidázzal) kombinálják. Az enzim jelenlétét az enzim hatására színezett szubsztrát segítségével határozzuk meg. A legszélesebb körben alkalmazott szilárd fázisú ELISA.

1) Antigén detektálás. Az első szakasz specifikus antitestek adszorpciója a szilárd fázison, amelyek a műanyag panelek üregeinek polisztirol vagy polivinil-klorid felületei. A második szakasz a vizsgálati anyag hozzáadása, amelyben feltételezzük az antigén jelenlétét. Az antigén az antitestekhez kötődik. Ezt követően a kutakat megmossuk. A harmadik szakasz egy specifikus szérum hozzáadása, amely antigén ellen antitesteket tartalmaz, enzimmel jelölve. A jelzett antitestek kötődnek az antigénekhez, és a felesleges antitesteket mosással eltávolítják. Tehát, ha antigének vannak a vizsgálati anyagban, akkor a szilárd fázis felületén enzim komplexel jelölt antitest-antigén-antitestek képződnek. Szubsztrátot adunk az enzim kimutatására. A peroxidáz esetében a szubsztrát ortofenilén-diamin, H-vel keverve2RÓL RŐL2 pufferoldatban. Az enzim hatására olyan termékek képződnek, amelyek barna színűek.

2) Antitestek kimutatása. Az első szakasz a specifikus antigének adszorpciója a kutak falain. Jellemzően a kereskedelmi vizsgálati rendszerekben az antigének már adszorbeálódtak a kutak felületén. A második szakasz a tesztszérum hozzáadása. Antitestek jelenlétében antigén-antitest komplex képződik. A harmadik szakasz - mosás után egy enzimmel jelölt antiglobulin antitestet (humán globulin elleni antitestet) adunk a lyukakhoz. A reakció eredményeit a fentiek szerint értékeljük..

Kontrollként a kereskedelmi rendszerekben kapható, pozitívnak és negatívnak ismert mintákat használják..

Az ELISA-t számos fertőző betegség, különösen a HIV-fertőzés, a vírusos hepatitis diagnosztizálására használják.

Az immunblotolás az ELISA egyik típusa (az elektroforézis és az ELISA kombinációja). A biopolimereket, például a humán immunhiányos vírus antigénjeit gélelektroforézissel választjuk el. Ezután az elválasztott molekulákat ugyanabban a sorrendben helyezzük át a nitrocellulóz felületére, mint amilyenek a gélben voltak. Az átviteli folyamatot nevezzük blottolásnak, a kapott nyomtatást pedig blotnak (blot). Ezt a lenyomatot befolyásolja a teszt szérum. Ezután adjunk hozzá humán globulinok elleni szérumot, amelyet peroxidázzal jelölünk, majd a szubsztrátot, amely az enzim hatására barnává válik. Barna csíkok képződnek ott, ahol az antitestek az antigénekhez kötődnek. A módszer lehetővé teszi a vírus egyes antigénjeivel szembeni antitestek kimutatását.

Radioimmunoassay (RIA). A módszer lehetővé teszi az antigén mennyiségének meghatározását a tesztmintában. Először egy antigént feltételező anyag kapcsolódik az immunszérumhoz, majd egy ismert antigén, amelyet radioizotóppal jelölünk, például I 125. Ennek eredményeként egy detektálható (jelöletlen) és ismert jelölt antigén korlátozott számú antitesthez kötődik. Mivel a jelölt antigént egy bizonyos dózisban adják hozzá, meg lehet állapítani, hogy mekkora része kötődik az antitestekhez, és melyik része maradt szabad a jelöletlen antigénnel folytatott verseny miatt, és eltávolították. Az antitestekhez kötött jelölt antigén mennyiségét számláló segítségével határozzuk meg. Fordítottan arányos a kimutatott antigén mennyiségével.

Immunelektron mikroszkópia (IEM). Elektronsűrű anyaggal jelölt specifikus antiszérum kapcsolódik egy antigénhez, például egy influenzavírushoz. Fém fehérjéket (ferritin, hemocianin) vagy kolloid aranyat használnak címkeként. Elektronmikroszkóp alatt mikroszkóp alatt olyan fényképeket készítenek, amelyeken az influenza virionok láthatók csatolt sötét pontokkal - jelölt antitestek molekulái.

tesztkérdések

Szerzett immunitás, különbsége az örökletestől (specifikus, veleszületett). A megszerzett immunitás típusai.

Egy feladat. A családban a hároméves Valery gyermek diftéria betegségben szenvedett. A többi családtag nem betegedett meg, az anyának gyermekként diftéria volt, az apát pedig diftéria toxoiddal oltották be. Ötéves nővérét, Natashát orvosi ellenjavallatok miatt egyszerre nem oltották be diftéria toxoiddal, ezért sürgősségi profilaxison kellett átesnie a diftéria elleni antitoxikus szérum segítségével. Az öccse, Vitaly, három hónapos, nem lett beteg, bár semmivel sem oltották be. A házban van egy macska és egy kutya, ők nem betegek. Nevezze meg a családtagok és az állatok esetében az immunitás típusát, amelynek köszönhetően nem betegedtek meg.

Mi az antigén? Milyen anyagok lehetnek antigének? Teljes antigének és haptének, miben különböznek egymástól? Antigénszerkezet. Hogyan hívják az antigénmolekula azon részét, amely meghatározza annak specifitását? Nevezzen meg Ön által ismert antigéneket. Mik azok az autoantigének? Mikrobiális sejt antigénszerkezete. Flagellátus és szomatikus antigének; lokalizáció, betűjelzés, kémiai jelleg, a hőmérséklethez való viszony, az előállítási módszer, a gyakorlati alkalmazás. Toxoid, tulajdonságai, alkalmazása, előállítása. Milyen szövet alkotja a szervezet immunrendszerét? Jelölje meg az emberi immunrendszer központi és perifériás szerveit. Írja le a humorális és a sejtes immunválasz kialakulását. Jelölje meg az antigént befogó és emésztő sejteket; sejtek, amelyek kölcsönhatásba lépnek a humorális immunitás, a sejtes immunitás kialakulásában; sejtek, amelyek átalakulnak és átalakulnak antitesteket termelő plazmasejtekké; sejtek, amelyek stimulálják ezt a folyamatot; az immunválaszt elnyomó sejtek; sejtek, amelyek elpusztítják a tumorsejteket és a vírussal fertőzött sejteket. Mik azok az antitestek? Hogyan lehet immunszérumot kapni? Hogyan juthat a tetanus toxint semlegesítő szérumhoz? Milyen antigének ellen képződnek az antitoxinok, agglutininek, hemolizinek? Milyen antitestek keletkeznek, amikor diftéria toxoid kerül a szervezetbe? diftéria baktériumok? Az antitestek kémiai jellege és szerkezete. Mi az immunglobulin aktív helye? Sorolja fel az immunglobulinok osztályait, tulajdonságait! Adja meg a placentán átjutni képes immunglobulinok osztályát. Milyen osztályba tartoznak a szekréciós immunglobulinok? Az antitestek felhalmozódásának dinamikája. Miben különbözik a másodlagos immunválasz az elsődlegesétől? Hogyan használják az immunválasz dinamikájáról szóló ismereteket a gyakorlati orvostudományban? Mik az immunitási reakciók, mi a mechanizmusuk, a reakció fázisai. Milyen 2 irányban alkalmazzák az immunreakciókat? Sorolja fel az immunitás reakcióit!.

Egy feladat. Cserélje ki a hiányzó szavakat: "toxoid" vagy "antitoxin": _________ egy antigén, _________ egy antitest, __________ aktív immunitást hoz létre, ha bejut a szervezetbe, __________ passzív immunitást hoz létre, ha bejut a szervezetbe, __________ állati immunizálással, ___________ áll elő egy toxinból, ha ki van téve formalin és hő, ___________ semlegesíti a toxinokat, __________ antitestek képződését idézi elő a szervezetben.

Agglutinációs reakció: mi az agglutináció, mi az antigén, mi az antitest; a beállítás módszerei, milyen ellenőrzések vannak beállítva és miért; milyenek legyenek a vezérlők. Agglutináló szérumok, mit tartalmaznak, hogyan állítják elő, mire használják őket; mi a szérum agglutináló titere? Közvetett (passzív) hemagglutinációs reakció: mi szolgál ebben a reakcióban antigénként, hogyan állítják elő, a reakció mechanizmusa. Mi az eritrocita diagnosticum? Mi az antitest vörösvértest diagnosztika? Csapadékreakciók: mi a csapadék, mi az antigén; hogyan lehet kiváltani a szérumot? Mi az a kicsapódó szérumtiter? Beállítási módszerek, gyakorlati alkalmazás.

Komplement-fixációs reakció (CBC): CBC-elv; mi alakul ki, amikor az immunszérum kölcsönhatásba lép egy specifikus antigénnel; mi történik a komplementtel, ha jelen van az interakció során? Mi a komplement sorsa, ha nincs specifikus affinitás az antigén és az antitestek között? Ha a CSC végeredménye a hemolízis, mit jelent - pozitív vagy negatív? Az RSK felállításának módszertana. Miért kell inaktiválni a tesztszérumot? Hemolitikus szérum: mit tartalmaz, hogyan állítják elő, mi a titer és hogyan határozzák meg? Kiegészítés: kémiai természet, a magas hőmérséklethez való viszony, hol van? Hogyan lehet elpusztítani a kiegészítőt? Amit gyakorlatilag kiegészítőként használnak?

Egy feladat. A gyilkossággal vádolt férfi ruházatán vérfoltot találtak. Milyen reakcióval lehet megállapítani, hogy emberi vérről van-e szó; mi lesz az antigén ebben a reakcióban, és mi lesz az antitest; milyen diagnosztikai termék álljon rendelkezésre a laboratóriumban ehhez a reakcióhoz, hogyan készül?

Egy feladat. Hogyan lehet kicsapási reakcióval meghatározni, hogy az elemzés céljából szállított szarvasmarha- vagy lóhús-minta; milyen diagnosztikai gyógyszerekre van szükség?

Agar gél kicsapási reakció, kötési módszerek, gyakorlati alkalmazás.

Szerológiai vizsgálatok: mi ez, diagnosztikai módszerek, a szállítás folyamata, az eredmények értelmezése

Mindannyian életünk során legalább egyszer szembesültünk fertőző betegségekkel. Mindegyiket számos kórokozó okozza: baktériumok, vírusok, protozoonok és gombák. A mikrobiológiában több millió mikroorganizmus található, amelyek az emberekben fertőzés kialakulásához vezethetnek.

Közülük opportunista kórokozók, mások kötelező kórokozók. Az orvostudományban rengeteg laboratóriumi módszer létezik a kórokozó azonosítására. Mindegyiknek megvannak a maga hátrányai és előnyei. A módszer érzékenysége és pontossága nagy jelentőséggel bír..

A leggyakrabban alkalmazott módszerek a genetikai molekuláris és a szerológiai vizsgálatok. Amikor molekuláris és szerológiai vizsgálatokra szóló beutalót kapnak, a betegek elgondolkodnak azon, hogy mi ez, és úgy vélik, hogy ez egy nagyon nehéz vizsgálat. Valójában az elemzés átadása nem haladja meg az 5 percet, és az információtartalom 95-100% között mozog.

  1. Mi a szerológiai elemzés
  2. Előnyök és hátrányok
  3. Milyen esetekben írják elő
  4. Diagnosztikai módszerek
  5. Immunfluoreszcens reakció RIF
  6. Az RNGA közvetett hemagglutinációs reakciója
  7. ELISA enzim immunvizsgálat
  8. Hogyan készüljünk fel a szállításra
  9. Elemzési folyamat
  10. Az eredmények dekódolása
  11. Mi a teendő, ha nemi úton terjedő betegséget észlelnek

Mi a szerológiai elemzés

A szerológiai vizsgálatok a fertőző betegség okának azonosításának fontos eszközei. A szerodiagnosztika egy specifikus vérvizsgálat, amely az antigének és antitestek kölcsönhatásán alapul a szérumban.

Az antitestek olyan fehérjemolekulák, amelyek az emberi testben néhány nappal a patogénnel való érintkezés után keletkeznek. Ezek szigorúan az egyes fertőzésekre vonatkoznak, és a kórokozó elpusztítására lettek kifejlesztve. Ezeknek a fehérjefrakcióknak a felismerése lehetővé teszi a mikroorganizmus gyors azonosítását, amelyhez keletkeztek. Az antigének viszont idegen baktériumok. A szintetizált antitest egy antigént talál a vérben, és szilárdan kötődik hozzá, megakadályozva, hogy káros hatással legyen a testre.

E két fehérje egyetlen komplex képződéséhez kötődő reakciója az összes szerológiai reakció felhasználásának alapja. Az antitestek keresésére speciális standard oldatokat használnak patogén antigénekkel (diagnostikumok), amelyeket hozzáadnak az elemzett vérhez. A szerodiagnosztika meghatározza a fertőzések összes fehérjemarkerét, és az eredmények ezt követő dekódolása szintén információt nyújt a betegség időtartamáról. Ez a jellemző csak a szerológiai elemzésre jellemző, ami számos klinikai helyzetben a választott módszerré teszi..

Előnyök és hátrányok

A laboratóriumi diagnosztika szerológiai módszere számos előnnyel jár, amelyek mélyen bevezetik a gyakorlatba az orvostudomány minden ágában: nőgyógyászat, urológia, fertőző betegségek és venerológia.

A szerodiagnosis egy nyilvánosan elérhető teszt, amely gyors, pontos eredményeket nyújt. Nem igényel hosszadalmas előkészítést az anyaggyűjtéshez, és minden beteg könnyen elviseli. A vénás vért a betegből csak 48 órán keresztül kell betartani. A szerológiai teszteknek szintén magas a specifitásuk (100%), az érzékenységük (95%) és a pontosságuk (90-95%).

De a vénás vérnek ez az elemzése sok költséges diagnosztikát igényel, ami szintén befolyásolja annak költségét. Néhány kórokozó gyengén immunogén, vagyis a szervezet kevés ellenanyagot termel ellenük, ezért a szerodiagnosztika lehetetlen. Ezenkívül a módszert sokkal ritkábban alkalmazzák vírusos fertőző patológiák esetében, hatékonyságában alacsonyabb szintű, mint a PCR-elemzés..

Milyen esetekben írják elő

A fertőző betegségek diagnosztizálásához szerológiai laboratóriumi vérvizsgálatokat írnak elő: bakteriális, vírusos, protozoon, parazita és vegyes fertőzések. Az antitest detektálást a szülészeti-nőgyógyászati ​​és urológiai gyakorlatban használják a legszélesebb körben. Az urológiában ezt a laboratóriumi vizsgálatot ismeretlen etiológiájú urethritis, balanitis és balanoposthitis esetén alkalmazzák. A nőgyógyászatban vizsgálatot küldenek a reproduktív rendszer bármilyen gyulladásos folyamatára (vulvovaginitis, colpitis, cervicitis és endometritis)..

A szülészetben minden terhes nőnek vénás vérvizsgálatot írnak elő a magzatra veszélyes betegségek kizárása érdekében. Ezeket a fertőzéseket "TORCH-komplexnek" nevezik, és szerológiai tesztek segítségével határozzák meg őket. A TORCH-fertőzések rendellenességeket okoznak a fejlődő magzatban, amelyek gyakran összeegyeztethetetlenek az élettel. Ezért ezeknek a fertőzéseknek a korai és pontos diagnosztizálása a szülész-nőgyógyász fő célja. A szerológiát akkor is elvégzik, ha gyanú merül fel a férfi vagy a női meddőség miatt a fertőző patológia miatt.

Ha az orvos gyanítja, hogy a beteg nemi úton terjedő fertőzésben szenved, átfogó vizsgálatra van szükség, beleértve a szerodiagnosztikát is. Ha az egyik partnernél kiderül, hogy az STI csoportból származó betegség van, akkor a második partnert tesztelni kell, még akkor is, ha nincsenek klinikai tünetei.

Diagnosztikai módszerek

A szerológiai reakcióknak több típusa van. Mindegyikük antitestek (immunglobulinok) és antigének keresésén alapul, de ezeket különböző módon végzik, és eltérő diagnosztikai kritériumokkal rendelkeznek a diagnózis felállításához. A laboratóriumi kutatás szerológiai módszerei a módszertantól függően egyszerűekre és összetettekre oszthatók. A besorolás azon alapul, hogy hány fehérjét kell megtalálni: az egyszerű reakciókat csak az antitestek vagy antigének, a komplexeket pedig az "antigén + immunglobulin" komplexek határozzák meg. A komplex kutatási módszer előnyösebb, mert az elemzés érzékenysége sokkal nagyobb.

Leggyakrabban laboratóriumokban a szerológiai diagnosztikát a következő immunokémiai szeroreakciók jelentik:

  • immunfluoreszcencia reakció (RIF);
  • enzim immunvizsgálat (ELISA);
  • közvetett hemagglutinációs reakció (RNGA);
  • komplement rögzítési reakció (CBC).

Az ilyen típusú kutatások összetett szeroreakciókra utalnak, és jelentős előnyökkel rendelkeznek a többivel szemben. Rendkívül gyorsan hajtják végre őket, nagy pontossággal diagnosztizálják a betegségeket, és nem igényelnek hosszú előkészítést: a páciensnek csak vénás vérvizsgálatot kell elvégeznie.

Immunfluoreszcens reakció RIF

Az immunfluoreszcens reakció (RIF) vagy a Koons-analízis egy módszer a kórokozó antigénjeinek gyors kimutatására a beteg biométerében. Az RIF-hez speciális festéket használnak - fluorokrómot, amely lumineszcens mikrobiológiai mikroszkóp alatt ragyoghat. Fluorokrómot adunk a diagnosztikai szérumhoz a koncentráció szigorú betartásával, különben a reakció hamis eredményeket mutathat. Az immunfluoreszcens reakció kétféle lehet: közvetlen és közvetett.

A közvetlen Koons-reakció csak a kórokozó antigénjeit tárja fel. Meghatározásukhoz diagnosztikai szérumot adnak a biológiai anyaghoz, amely antitestekből és fluorokrómból áll. A kórokozó sejtfalán lévő antigének a festett antitestekhez kötődnek. A laboratóriumi reakció orvos mikroszkóp alatt megvizsgál egy üveglemezt, és élénkzöld ragyogást lát. Egy ilyen reakció tipikus példája a klamidia azonosítása, szemben az Evans kékkel.

Az indirekt RIF (RNIF) meghatározza az antigén-antitest komplexeket. Ehhez az orvos egymás után jelöletlen immunglobulinokat ad a mintához, hogy azok antigénekhez kötődjenek. Ezután egy új szérumot adunk a kialakult immunkomplexekhez, amely a nemrégiben képződött komplexek már festékkel jelölt antitesteket tartalmaz. A leggyakoribb közvetlen reakciót a vírusos betegségek diagnosztizálására használják..

E reakciók egyetlen hátránya a szubjektivitás bizonyos mértéke az eredmények figyelembevételével: ugyanazt a ragyogásintenzitást az orvosok néha másképp tekintik, ami végül hamis laboratóriumi vizsgálati adatokhoz vezet..

Az RNGA közvetett hemagglutinációs reakciója

Az RNGA egy elemzés, amelynek célja a különböző biológiai folyadékokban lévő immunglobulinok vagy antigének kimutatása. A közvetett hemagglutinációs reakció az egyik legpontosabb módszer az immunglobulinok titerének meghatározására, amely lehetővé teszi a fertőző folyamat stádiumának megítélését. Az immunglobulinok titerének négyszeres növekedése két, több hetes intervallummal végzett vérvizsgálatban a bakteriális vagy vírusos etiológia akut fertőző folyamatát jelzi. Az RNGA lehetővé teszi a kezelőorvos számára a helyes gyógyszeres kezelés felírását, figyelembe véve a betegség stádiumát. A tanulmányt széles körben alkalmazták nemi úton terjedő betegségek, meningococcus fertőzés, botulinum toxin (botulinum toxin) és a legtöbb vírusfertőzés kimutatására..

A vizsgálathoz vörösvértesteket - vörösvértesteket - használnak, amelyek felszínén antigének vagy antitestek találhatók. A szérumot antigén vagy antitest eritrocita diagnosztikának hívják. Diagnosticumot adunk a teszt vérhez, majd figyelemmel kísérjük a reakciót. Amikor ezek az eritrociták antigénekhez vagy vér immunglobulinokhoz kapcsolódnak, komplexek keletkeznek, és a vörösvérsejtek kicsapódni kezdenek. Negatív teszt esetén a vörösvérsejtek kicsi, gomb alakú foltként halmozódnak fel. Ha a kémcső vagy a tabletta alján egy esernyő alakú, fésült szélű csapadék képződött, akkor a reakció pozitívnak tekinthető.

A szerológiai teszt elvégzésének nehézségét az eritrocita diagnosticum pontos előkészítésének és az alkalmazott komponensek koncentrációjának szigorú betartásának szükségessége jelenti..

ELISA enzim immunvizsgálat

Az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálatot tartják a legpontosabb, specifikusabb és legérzékenyebb szeroreakciónak. Az ELISA eredmények könyvelése automatizált, az emberi tényező és a szubjektív adatok értékelése kizárt. Az eredmény pontossága eléri a 98% -ot, és ismételt vizsgálat esetén - 100%. Az ELISA-t nemi úton terjedő fertőzések, HIV, vírusos hepatitis A, B, C, D, E, TORCH fertőzések és sok más betegség diagnosztizálására használják..

Ennek az elemzésnek több mint tíz módosítása van (közvetlen, közvetett, nem versenyképes, szilárd fázisú stb.), De mindegyikük rendelkezik speciális, jellegzetes diagnosztikai jellemzőkkel, de hasonló magatartási elvvel. Az immunvizsgálati szerológiai reakciók fázisai magukban foglalják egy antigén-antitest komplex létrehozását, amelyhez enzimeket adnak, amelyek egy jelölő szerepet játszanak. Ezután a vizsgálati anyagot egy speciális lemezre helyezzük, egy automatizált rendszerbe helyezzük, és megkezdjük a radionuklidokkal címkézett komplexek keresését. Az analizátor fényjeleket észlel, megméri az immunsejtek optikai sűrűségét és lumineszcenciájának mértékét, majd megadja az elemzés eredményét.

Hogyan készüljünk fel a szállításra

Az elemzés nem igényel különösebb előkészítést, az összes szabály megfelel a vénás vér szokásos adományozásának.

A páciensnek számos egyszerű szabályt szigorúan be kell tartania:

  • 72 órával a manipuláció előtt étrendet kell követnie: nem ehet zsíros, sült, sós és fűszeres ételeket, az alkoholos italok szintén tilosak;
  • ajánlott az optimális vízháztartás fenntartása a testben, ehhez legalább két liter tiszta ivóvizet kell inni;
  • a vénás vér elemzését éhgyomorra végezzük, ezért legalább 10 órával a manipuláció előtt nem lehet enni, inni teát, kávét és más italokat;
  • Tilos a dohányzás 4 órával az eljárás előtt.

Ha egészségügyi okokból a betegnek tablettát kell inni, erről előzetesen értesítenie kell a kezelőorvost. Az anyag leadása előtt egy órával ajánlott elkerülni a fizikai aktivitást, és mielőtt belépne a kezelőterembe, le kell ülnie és pihenni 10-15 percig.

Elemzési folyamat

A szerológiai vizsgálat céljából vénás vérmintát reggel végeznek. A páciensnek előzetesen meg kell érkeznie a laboratóriumba, magával kell vennie a szükséges dokumentumokat (útlevél és elemzésre utalás).

Felajánlják, hogy a beteg elmegy a kezelőszobába, és kényelmesen leül a székre. A vért egy könyökhajlási területen lévő vénából veszik, ezért meg kell szabadítani az alkar és a könyök területét a dolgoktól. Sérítőt a vállra kell helyezni, és a kar alá párnát helyeznek. A nővér eldobható, steril kesztyűt vesz fel, és fertőtlenítőszerbe mártott vattacsomóval kezeli a szúrás helyét..

A vénás injekció végrehajtásának algoritmusa magában foglalja a vénának a vénába történő pumpálását, ehhez arra kérik a beteget, hogy többször szorítsa össze és hajtsa le az öklét. Ebben az esetben az ér jobban láthatóvá válik és tapintható, ami megkönnyíti az anyag összegyűjtését. Az ápolónő ezt követően a vénába helyezi a fecskendő tűjét, 10 milliliter vért vesz fel, és baktericid tapaszt alkalmaz az injekció beadásának helyén. A hematoma kialakulásának elkerülése érdekében manipuláció után a karot 15-20 percig a könyöknél kell meghajlítani.

Az eredmények dekódolása

A helyes diagnózis érdekében a szerológiai reakciókat szakképzett szakembernek kell megfejtenie. Az antitestek kimutatása még nem jelzi a betegség jelenlétét, egyes esetekben az immunoglobulinok vérkeringése a norma. Tehát testünkben folyamatosan jelen vannak IgM antitestek a kanyaró, bárányhimlő stb. Ezek az előző fertőzés markerei, és megvédenek minket az újrafertőzésektől. Ezért a vérvizsgálat eredményeinek regisztrálását és a szerológiai vizsgálat dekódolását minden beteg esetében egyedileg kell elvégezni..

A fertőző betegségekre azonban vannak bizonyos szerológiai markerek:

  • Az A osztályú immunglobulinok kimutatása a vérben vírus vagy baktérium hatására legfeljebb 14 napig tartó akut fertőző folyamatot jelez.
  • Ha az M osztályú immunglobulinok megtalálhatók a vérben, akkor kiterjesztett laboratóriumi diagnosztikára van szükség, mivel ezek az antitestek mind a múltbeli betegség, mind a tartós fertőzés markerei.
  • Az antitest-titer négyszeres vagy annál nagyobb növekedése két egymást követő vérvizsgálatban fertőző betegség jelenlétét jelzi.
  • Bármely kórokozó antigén kimutatása azt jelzi, hogy a kórokozó jelen van a testben.

Nem egyértelmű diagnosztikai kép esetén ismételt szerológiai vizsgálatokat végeznek, vagy a vizsgálatot más kutatási módszerekkel (PCR, baktériumtenyészet stb.) Egészítik ki.

Mi a teendő, ha nemi úton terjedő betegséget észlelnek

Ha a szerológiai diagnosztika megerősítette az STI jelenlétét, akkor a folyamat szövődményeinek és krónikusságának elkerülése érdekében azonnal tovább kell lépni a kezelés szakaszába. A betegnek újra regisztrálnia kell a kezelőorvoshoz való konzultációra. Etiotrop komplex kezelést ír elő, és a gyógyszeres kezelés során dinamikusan figyelemmel kíséri a beteg állapotát..

Cím: Szerológiai kutatás: mi ez, vérvizsgálat a fertőzések meghatározására, az adományozás és a megfejtés módszere, a betegségek meghatározásának reakciómódszerei

Leírás: Mik azok a szerológiai vizsgálatok, és annak azonosítására, hogy milyen betegségeket alkalmaznak. Hogyan történik a vérvizsgálat a fertőzés meghatározására. Hogyan kell elkészíteni, átadni és megfejteni az eredményt, miután megkapta. A betegség meghatározására szolgáló reakciók végrehajtásának technikái.

Szifilisz vérvizsgálat (RW)
(Wasserman reakció)

Vérvétel

  • Általános leírása
  • Szabványok
  • Betegségek

Általános leírása

A Wassermann-reakció (RW) a legnépszerűbb immunológiai reakció, amelyet a szifilisz diagnosztizálására használnak 1906-os felfedezése óta. Az RW a komplementkötési reakciók (CSC-k) csoportjába tartozik, és azon alapul, hogy a szifiliszben szenvedő betegek vérszéruma képes-e komplexet alkotni a megfelelő antigénekkel. A szifilisz diagnosztizálásához használt modern CSC-módszerek antigénjeikben jelentősen eltérnek a klasszikus Wasserman-reakciótól, azonban a "Wasserman-reakció" kifejezést hagyományosan megtartják..

A fertőzött személy vérében az immunrendszer által termelt antitestek jelennek meg. A betegség kórokozója, a treponema pallidum a kardiolipin antigént tartalmazza, amely az RW által meghatározott antitestek termelését okozza. A pozitív Wasserman-reakció csak jelzi az ilyen antitestek jelenlétét az emberi vérben, és ennek alapján következtetést vonunk le egy betegség jelenlétéről.

A hemolízis reakciója az RSC kutatási eredményének mutatója. Két komponens vesz részt a reakcióban: juh vörösvértestek és hemolitikus szérum. Hemolitikus szérumot nyúl nyirok eritrocitákkal történő immunizálásával nyerünk. 30 percen belül inaktiválódik 56 ° C hőmérsékleten. Az RSC eredményeit a hemolízis jelenlététől vagy hiányától függően értékeljük a kémcsövekben. A hemolízis jelenlétét azzal magyarázzák, hogy ha a vizsgált szérumban nincsenek szifilitikus antitestek, akkor az antigén-antitest reakció nem következik be, és az egész komplement a bárány eritrocitái-hemolizin reakciójához megy. És ha vannak specifikus antitestek, akkor a komplement teljesen az antigén-antitest reakcióba megy, és a hemolízis nem következik be.

A Wasserman-reakcióhoz szükséges összes összetevőt ugyanabban a térfogatban - 0,5 vagy 0,25 ml - vesszük. A komplement komplexének szilárd rögzítéséhez egy adott komplexen a vizsgált szérum, antigén és komplement keverékét 45-60 percig 37 ° C-os termosztátba helyezzük. (A reakció I. fázisa), amely után hemolitikus rendszert vezetnek be, amely bárány eritrocitákból és hemolitikus szérumból áll (a reakció II. Fázisa). Ezután a csöveket ismét egy termosztátba helyezzük 30-60 percig a kontroll hemolízise előtt, amelyben az antigént sóoldattal helyettesítjük, és sóoldatot adunk a tesztszérum helyett. A Wasserman-reakció antigénjeit készen szabadítják fel a titer és a hígítási módszer megjelölésével.

A Wasserman-reakció maximális pozitivitását általában a keresztezések számával jelöljük: ++++ (élesen pozitív reakció) - a hemolízis teljes késését jelzi; +++ (pozitív reakció) - a hemolízis jelentős késleltetésének felel meg, ++ (gyengén pozitív reakció) - a hemolízis részleges késésének bizonyítéka, + (kétes reakció) - a hemolízis enyhe késleltetésének felel meg. A negatív RW-t az összes kémcsőben teljes hemolízis jellemzi.

Néha azonban hamis pozitív eredmények is lehetségesek - ez annak a ténynek köszönhető, hogy a kardiolipin bizonyos mennyiségben benne van az emberi test sejtjeiben. Az emberi immunrendszer nem hoz létre antitesteket a "saját" kardiolipin ellen, de vannak kivételek e szabály alól, amelyek miatt egy teljesen egészséges embernél pozitív Wasserman-reakció lép fel. Ez különösen gyakran súlyos vírusos és más betegségek - tüdőgyulladás, malária, máj- és vérbetegségek - után következik be terhesség alatt, azaz az immunitás súlyos gyengülésének pillanataiban.

Ha az orvos gyanítja, hogy a betegnek hamis pozitív eredménye van a Wasserman-reakció miatt, akkor számos további vizsgálatot írhat elő számára, amelyeket általában a nemi úton terjedő betegségek diagnosztizálásához használnak..

Betegségek és esetek, amikor az orvos vérvizsgálatot írhat elő az RW-re

  • Szifilisz.
  • Szifilisz gyanúja a szifiliszes betegekkel kapcsolatba került embereknél.
  • Terhesség.
  • Drog függőség.
  • Abortusz.
  • Láz, amelyet a regionális nyirokcsomók növekedése kísér.
  • Első látogatás a klinikán.
  • Kórházi felvétel kezelésre.
  • Pszichiátriai vagy neurológiai kórházban történő kezelés.
  • Vér, szövetek, sperma és egyéb testtitkok adományozása.
  • Munka a szolgáltató szektorban, a kereskedelemben, az orvosi ellátásban, a szociális és oktatási szférában.

RW vérvizsgálati eljárás

Az RW-n lévő vért csak éhgyomorra adják. Az utolsó étkezésnek legkésőbb 6 órával a teszt előtt kell lennie. Az egészségügyi szakember leülteti a pácienst, vagy kanapéra helyezi, és 8-10 ml vért vesz az ulnáris vénából.

Ha az elemzés egy csecsemő számára szükséges, akkor a kerítést a koponya vagy a nyaki vénából kell elvégezni.

Előkészítés az RW vérvizsgálatának leadásával

A vizsgálat előtt 1-2 nappal hagyja abba az alkoholfogyasztást. Szintén nem ajánlott zsíros ételeket fogyasztani - ezek torzíthatják az eredményt. Az elemzés előkészítése során tartózkodnia kell a digitalis gyógyszerek szedésétől.

Ellenjavallatok

Az elemzés eredménye hamis lesz, ha:

  • a beteg testhőmérséklete megemelkedik,
  • egy személy fertőző betegségben szenved, vagy éppen most szenvedett,
  • egy nőnek menstruációs ideje van,
  • terhes a szülés előtti utolsó hetekben,
  • az első 10 nap a szülés után,
  • a baba életének első 10 napja.

Az elemzési eredmények értelmezése

Az elsődleges szifiliszben a Wasserman-reakció a betegség lefolyásának 6-8. Hetében válik pozitívvá (az esetek 90% -ában), miközben a következő dinamikát észlelik:

  • a fertőzés utáni első 15-17 napban a legtöbb beteg reakciója általában negatív;
  • a betegség 5-6. hetében a betegek körülbelül 1/4-én a reakció pozitívvá válik;
  • 7-8 hetes betegség esetén az RW a legtöbb esetben pozitívvá válik.

Másodlagos szifiliszben az RW mindig pozitív. Más szerológiai reakciókkal (RPHA, ELISA, RIF) együtt lehetővé teszi nemcsak a kórokozó jelenlétének azonosítását, hanem a fertőzés hozzávetőleges idejének megismerését is.

A szifilitikus fertőzés kialakulásával a betegség 4. hetében, az elsődleges szifilóma megjelenése után a Wasserman-reakció negatívról pozitívra változik, így marad a másodlagos friss és a szifilisz másodlagos visszatérő periódusában. A látens másodlagos periódusban és kezelés nélkül az RW negatívvá válhat, így a szifilisz klinikai kiújulásának kezdetekor ismét pozitívvá válik. Ezért a szifilisz látens periódusában a negatív Wasserman-reakció nem jelzi annak hiányát vagy gyógyulását, hanem csak kedvező prognosztikai tünetként szolgál.

A szifilisz harmadlagos periódusának aktív elváltozásaiban az esetek körülbelül 3/4 -ében pozitív RW fordul elő. Amikor a szifilisz harmadlagos periódusának aktív megnyilvánulásai eltűnnek, gyakran negatívvá válik. Ebben az esetben a betegek negatív Wasserman-reakciója nem jelzi, hogy nincs szifilitikus fertőzésük..

A korai veleszületett szifiliszben az RW szinte minden esetben pozitív, és értékes módszer a betegség igazolására. Késői veleszületett szifilisz esetén eredményei megegyeznek a szerzett szifilisz harmadlagos időszakában elért eredményekkel.

Nagy gyakorlati jelentőségű a Wasserman reakciójának vizsgálata a kezelés alatt álló szifiliszes betegek vérében. Néhány betegnél az erőteljes antiszifilitikus terápia ellenére a Wasserman-reakció nem válik negatívvá - ez az úgynevezett szerorezisztens szifilisz. Ebben az esetben nincs értelme végtelenül végezni az antiszifilitikus terápiát, elérve az átmenetet a pozitív RW-ról a negatívra..

A fentiekből következik, hogy a negatív Wasserman-reakció nem mindig a szifilitikus fertőzés hiányának a jele a testben.

Pozitív Wasserman-reakció lehetséges számos olyan betegségben és betegségben, amelyek nem társulnak a szifiliszhez: tuberkulózis, szisztémás lupus erythematosus, vérbetegségek (leukémiák), lepra, pemphigus, leptospirosis, rosszindulatú daganatok, tífusz, skarlát, beriberi betegség, alvási betegség, terhesség alatt, szülés előtt vagy után, menstruáció, altatás után, alkoholfogyasztás után, kábítószer-fogyasztóknál, zsíros ételek, gyógyszerek szedése, idegen szérumok bevezetése. Ilyen esetekben más módszereket alkalmaznak a diagnózis tisztázására (RPGA, ELISA, RIF). A nem specifikus pozitív Wasserman-reakció malária esetén nagyon jellemző, különösen a támadás időszakában. Ezért, ha az RW pozitív egy olyan személynél, akinek nincs szifilisz klinikai megnyilvánulása és tagadja a szifiliszes fertőzést, mérlegelni kell a maláriát.

Mindezek azt jelzik, hogy a Wasserman-reakció pozitív eredménye még nem feltétel nélküli bizonyíték a szifilitikus fertőzés jelenlétére..

A teszt utáni helyreállítás

Vérvizsgálat után az orvosok megfelelő és kiegyensúlyozott étrendet javasolnak, valamint a lehető legtöbb folyadékot. Megengedheti magának a meleg teát és a csokoládét. Hasznos lesz tartózkodni a fizikai aktivitástól, és semmiképpen ne igyon alkoholt.

Szabványok

Normális esetben a hemolízist a vérben kell megfigyelni - ezt a szifiliszre gyakorolt ​​negatív reakciónak tekintik (Wasserman-reakció negatív). Ha nincs hemolízis, akkor meg kell mérni a reakció mértékét, amely a betegség stádiumától függ ("+" jelekkel jelölve). Tudni kell, hogy a teljesen egészséges emberek 3-5% -ának hamis pozitív reakciója lehet. Ugyanakkor a fertőzés utáni első 15-17 napban a beteg emberek reakciója hamis-negatív lehet..

Betegségek, amelyeknél az orvos vérvizsgálatot rendelhet el a szifiliszért (RW)

  1. 1. Szifilisz

  • Facebook
  • twitter
  • odnoklassniki
  • vkontakte
  • Youtube
  • levél

  • Online diagnózis
    © LLC "Intelligens Orvosi Rendszerek", 2012–2020.
    Minden jog fenntartva. A webhely adatait törvényileg védik, a másolást törvény bünteti.

    Reklám elhelyezés, együttműködés: [email protected]

    Az oldal nem felelős a felhasználók által az oldalon közzétett tartalom tartalmáért és pontosságáért, a webhely látogatóinak véleményéért. A webhely anyagai csak tájékoztató és tájékoztató célokat szolgálnak. Az oldal tartalma nem helyettesíti a szakmai orvosi tanácsadást, a diagnózist és / vagy a kezelést. Az öngyógyítás veszélyes lehet az egészségre!

    Szerológiai vérvizsgálat

    Mi a szerológiai vérvizsgálat?

    Szerológiai objektum - antigének és antitestek

    A szerológiai teszt (SI) az antigének és antitestek egymáshoz való kötődési képességén alapul. Az SI lehetővé teszi, hogy pontosan azonosítsa egy vírus vagy baktérium jelenlétét a páciensben, a vércsoportban és a rhesusban, a test reakcióképességét az antibiotikumokra, autoimmun betegségekre, hormonális rendellenességekre, a fehérjék egyéni specifitását, hogy meghatározza a terápia hatékonyságát..

    Az immunrendszer antitestek segítségével harcol a szervezetbe jutó patogén mikrobák (antigének) ellen, miközben sajátos típusú védelmet hoz létre az egyes vírusok, paraziták vagy baktériumok ellen..

    Az immunrendszer azon képessége, hogy különleges anyagokat állítson elő, amelyek semlegesítik a káros részecskéket, a tudósok számára már régóta ismertek. De az antigén-antitest reakciót laboratóriumi körülmények között csak a 19. század végén lehetett látni. Megállapították, hogy egy köteg képződése eredményeként a komplexek kicsapódnak, pelyheket vagy zavarosságot képeznek. Az ilyen reakciókat agglutinációnak és kicsapódásnak nevezzük. A 20. században a szerológia, a szérum tulajdonságainak tudománya gyorsan fejlődött, új diagnosztikai módszereket fedeztek fel, amelyek antigén-antitest reakciókon alapultak. Manapság az immun komplexek kimutatásának számos módja van, és az SI nélkülözhetetlen kapcsolat a diagnosztikában, a kezelésben, valamint az új gyógyszerek és oltások létrehozásában..

    Az elemzés indikációi.

    A szerológiai kutatást széles körben alkalmazzák a szülészetben

    A szerológiai tanulmányok egy modern embert kísérnek egész életében. Az első teszteket bizonyos antitestek kimutatására akkor hajtják végre, amikor a baba még mindig a méhben van. Egy terhes nő vért ad a különféle SI-kért, hogy meghatározza az esetleges Rh-konfliktust vagy fertőzéseket, amelyek károsíthatják a terhes magzatot. Gyermek születésekor várhatóan szerológiai vizsgálatokkal diagnosztizálják a veleszületett betegségeket. Ezt követően a vizsgálatokat a következő okok miatt végezzük:

    • vírusos, bakteriális, parazita fertőzések;
    • az aktivitás, a betegség fejlődési szakaszának azonosítása;
    • hormonális patológiák;
    • meddőség;
    • autoimmun betegség;
    • anyagcsere-betegség;
    • allergia;
    • onkológiai betegségek;
    • terhesség megtervezése, terhességi időszak, terhes nők patológiája;
    • a reumatoid faktor azonosítása;
    • a vércsoport és az Rh faktor meghatározása;
    • a különböző betegségek terápiájának hatékonysága;
    • az oltás hatékonysága;
    • preoperatív és posztoperatív periódus, ha szükséges egyes antitestek szintjének felmérése;
    • a test immunállapotának vizsgálata.

    Felkészülés a kutatásra.

    Célszerű a teszt előestéjén törölni a gyógyszerek szedését.

    Mivel a szerológiai vizsgálatok a vizsgálatok széles skáláját ölelik fel, minden egyes esetben szükség lehet bizonyos előkészületekre, de a szerológiai teszt sikeres teljesítéséhez általános szabályok vonatkoznak:

    • A vizsgálat előtti napon korlátoznia kell a zsíros és sült étrendet, kizárni az alkoholt.
    • Az utolsó étkezést az elemzés előtt 10-12 órával kell befejezni.
    • A véradás napján nem szabad kávét, teát vagy más italokat inni. Ihat kis mennyiségű tiszta vizet.
    • A gyógyszereket az elemzés előtt kizárják. Ha lehetetlen lemondani a recepciót, meg kell adnia az orvosnak a gyógyszerek teljes listáját, beleértve a vitaminokat, az orális fogamzásgátlókat.
    • Minden más vizsgálatot vagy orvosi manipulációt az SI után végeznek.
    • Vérvétel előtt 12 órával ajánlott abbahagyni a dohányzást.
    • Az előző napon kerülni kell a fizikai és érzelmi stresszt, és a vizsgálat előtt tanácsos 15 percig teljes pihenésben ülni.
    • A SI-t reggel írják fel, és éhgyomorra adják.

    Szerológiai vizsgálati módszerek.

    A szerológiában nagyon sokféle módszer alkalmazható

    Az antigén-antitest komplexek (Ag-Ab) meghatározásának minden módszere ismert Ag vagy Ab alkalmazásán alapul az ismeretlen keresésében. Ha Ar kimutatására van szükség, akkor specifikus Ab tartalmú diagnosztikai immunszérumok szükségesek. Ha az SI célja az Ab kimutatása, diagnosztikákat alkalmaznak - bizonyos Ag-t tartalmazó szuszpenziók.

    A szerológiai tesztek kvalitatív vagy kvantitatív eredményt tükrözhetnek. Egy kvalitatív vizsgálatban az eredmény lehet negatív vagy pozitív, vagyis a kívánt elem vagy megtalálható, vagy nem. A mennyiségi összeget számértékként vagy "+" jelekkel fejezzük ki (általában egytől négyig).

    A közvetett hemagglutináció az egyik diagnosztikai módszer

    Szerológiai kutatási módszerek:

    • Agglutináció. Ab kötése Ar-val, majd pelyhek vagy csapadék képződése. Közvetlen, közvetett, részletes, indikatív reakciókat alkalmaznak az antitestek kimutatására a szérumban.
    • Hemagglutináció. Olyan vörösvértesteket használnak, amelyeken Ag vagy Ab van adszorbeálva, és amelyeket a megfelelő Ab-re és Ar-ra ragasztanak. A kialakult komplexek kagylós üledék formájában hullanak ki.
    • Csapadék. Az Ag-Ab komplex képződése az ezt követő csapadék formájában, zavarosság formájában, csapadéknak nevezzük.
    • Alvadás. Ag kimutatása a staphylococcus sejtek fehérjére adszorbeált Ab segítségével.
    • A hemagglutináció gátlása. A szérumellenes antitestek elnyomják a vírus antitesteket, ennek eredményeként a vírusok elveszítik képességüket az eritrocitákhoz való tapadásukhoz.
    • Közvetett Coombs reakció. Meghatározzuk az eritrociták Ag felületének Ag felületét.
    • Gyűrűs csapadék. Immunszérum alapján, oldható Ag rétegekkel végezzük.
    • Kettős radiális immundiffúzió. A reakció az antiszérum és az Ag komponensek agar vagy agaróz üregekben történő diffúzióján alapszik.
    • Komplementkötési reakció. Az Ag és Ab közötti kapcsolatot a komplement adszorpciója kíséri; a juh eritrocitákat és az Ab-t hozzájuk a hemolitikus szérum összetételében használják indikátorként.
    • Semlegesítés. A vírus ágens antitestekkel történő semlegesítése alapján.
    • Az Ab és Ar fluoreszcens vagy enzimes összetételű jelölésén alapuló reakciók - immunfluoreszcens (RIF) és enzimhez kapcsolt immunszorbens (ELISA) módszerek.

    Immunfluoreszcencia módszer.

    "Ragyogás" sötétmezõs mikroszkópban

    Ez a módszer fluoreszcens anyaggal jelzett Ab alkalmazásán alapul. Leggyakrabban fluoreszcein-izotiocianátot használnak feliratként, amelynek zöld fénye van az ultraibolya sugarakban. Az elemzés eredményét a ragyogás fényességének mértéke alapján értékelik. Manuális meghatározási módszer alkalmazható fluoreszcens mikroszkóp, optikai mikroszkóp lumineszcens csatlakozással, valamint automatikus módszer mikrochip-citométer, áramlási citométer vagy robotfluoreszcens mikroszkóp alkalmazásával..

    A RIF közvetlen és közvetett módszerekkel történik. A közvetlen módszer azt jelenti, hogy a szorbált Ar közvetlenül kötődik az Ab jelzetthez. A közvetett módszer magában foglalja a címkézetlen Ab alkalmazását az Ar-hoz való kötődéshez, majd az Ab jelű hozzáadását, amely elkerüli a nem specifikus reakciókat.

    Kapcsolódó immunszorbens vizsgálat.

    Az immunvizsgálat mint a szerológiai diagnózis módszere

    Az ELISA az Ag-Ab komplexek azonosításán alapul, az egyik komponens jelölésével. Jelzőként különféle enzimeket használnak, amelyek egy enzimatikus reakció eredményeként színt képeznek. Különböző ELISA módszerek léteznek, homogén és heterogén módszerek közé sorolhatók..

    Homogén azt jelenti, hogy az összes reakció lépés oldatban megy végbe.

    A heterogén módszerek közé tartozik a fázisszétválasztás szilárd közeg alkalmazásával.

    A homogén-heterogén módszerek azon alapulnak, hogy az oldatban Ar-Ab komplexek képződnek, majd a szilárd fázist használják az elválasztáshoz..

    Az ELISA módszereknek sok változata van, ezek közül néhányat az alábbiakban mutatunk be..

    1. Szendvics módszer. Ar-oldatot adunk az immobilizált Ab-hez, a komplexek képződése után a hordozót a felesleges komponensekből mossuk, és az Ab jelzettet adjuk hozzá. Ennek eredményeként Ar csapdákat rögzít immobilizálva, és Ab-vel címkézik, innen ered a módszer neve..
    2. Nem versenyképes közvetett ELISA. Az Ab-vizsgálati szérumot hozzáadjuk az immobilizált Ag-hoz. Amikor komplexek képződnek, az Ab felesleget lemossák, és Ab-t jelölnek, amely megkötődhet a kutak felszínéhez kapcsolódó immunkomplexekkel..
    3. Versenyképes közvetlen ELISA. A tesztszérumot és az Ab jelzett konjugátumot hozzáadjuk az immobilizált Ag-hoz. Többféle Ag-Am komplex képződik: Ab jelzéssel és jelöletlen Ab-kel, amelyek versenyeznek egymással az Ar-val való kapcsolatért.

    Milyen fertőzéseket segít azonosítani egy szerológiai teszt?.

    A szerológiai diagnózis lehetővé teszi a kórokozó azonosítását

    Ha a betegnek bizonyos tünetei vannak, vagy más vizsgálatok betegségre utalnak, szerológiai vizsgálatot írnak elő.

    Szerológiai teszteket alkalmaznak a következő fertőzések diagnosztizálására:

    • hepatitis vírus A, B, C, D, E;
    • szifilisz;
    • HIV;
    • herpesz;
    • citomegalovírus;
    • rubeola;
    • kanyaró;
    • mumpsz;
    • Epstein-Barr;
    • Helicobacter;
    • chlamydia;
    • mikoplazma;
    • toxoplazma;
    • lamblia;
    • helmintusok;
    • ureaplasma;
    • parvovírus;
    • varicella-zoster vírus;
    • kullancs által okozott encephalitis vírus;
    • Dengue vírus;
    • szamárköhögés;
    • borrelia;
    • legionella.

    A szerológiai kutatási módszer előnyei a fertőzések diagnosztizálásában.

    Szerológiai diagnosztika - gyors és megfizethető

    Vérvétel

    A 20. század elején August Wassermann német immunológus szerológiai reakciót fedezett fel, amelyet még mindig használnak a szifilisz diagnosztizálására, és nevét RW rövidítés formájában viseli. A Wasserman reakciójának vérvizsgálata szerepel a kötelező vizsgálatok listájában, amelyeket terhes nők számára végeznek, mielőtt bármilyen műtétet elvégeznének.

    A Wasserman-reakció jellemzői

    Hogy milyen elemzésről van szó, azt az immunológia szempontjából magyarázzák. A vizsgálatot az RSK módszerével hajtjuk végre - a komplement kötődés reakciójával. A komplement olyan specifikus fehérjék csoportja, amelyek részt vesznek az immunválaszok komplex kaszkádjában. A veleszületett és megszerzett immunitás részei. A komplementrendszer addig inaktív, amíg a behatoló mikroorganizmusok által termelt idegen fehérje aktiválja.

    A klasszikus aktiválási út baktériummal való érintkezés után következik be. A felület saját antigénfehérjékkel rendelkezik. Idegenek az emberi testtől, válaszként antitestfehérjék termelődnek. Az antitestek stimulálásához komplementre van szükség, és miután antigénekkel komplex képződik, a mikroorganizmus láthatóvá válik az immun makrofág sejtek számára. Felszívják a baktériumokat és elősegítik a gyógyulást.

    Ha halvány treponemával, a szifilisz kórokozójával fertőzött, antitestek képződnek a szervezetben, amelyek hosszú ideig fennmaradnak. Koncentrációjuk alapján meghatározhatja a betegség fázisát, amelyet RW vérvizsgálat mutat be.

    A Wasserman-elemzéshez 5 komponens szükséges:

    • diagnosztizált antigén;
    • diagnosztikai antitestek;
    • indikátorantigén - juh vörösvértestek;
    • indikátor antitestek - nyúl hemolizinek;
    • kiegészítés.

    A reakció stádiumában 2 antigén-antitest rendszerre van szükség, az egyik egy indikátor, a másik pedig specifikus. Normális esetben az antigén és az antitest kölcsönhatását a komplement kötődése kíséri, míg egy komplex képződik, amely vizuálisan nem észrevehető. Ezért indikátoros hemolitikus rendszerre van szükség. A szérum érzékenyíti az eritrocitákat, érzékennyé teszi őket a komplement működésére. Ezért jelenlétében hemolízis következik be - a vörösvérsejtek bomlása, az oldat színes.

    Az RW vérvizsgálat eredményeinek értelmezése a hemolízis súlyosságán alapul. Ha a megoldás megtartotta eredeti átlátszó állapotát, az azt jelenti, hogy az összes komplement egy adott rendszerhez kötött. Ez az antigén-antitest komplexek megjelenésének indikátora, amely azt jelzi, hogy a vérszérumban szifilisz antigének vannak, és a testben ellenanyagok fejlődtek ki velük szemben. Ez az eredmény pozitív.

    Az antigén elleni specifikus antitestek hiányában a vérben komplexeik nem képződnek, a komplement nem aktiválódik és szabad marad. Megkötődik az indikátorfehérjékhez, az eritrociták hemolízisét okozza, és a kémcsőben lévő keverék pirosra vált, ami azt jelenti, hogy az RW vérvizsgálata negatív.

    Az RW vérvizsgálatokat laboratóriumban, steril körülmények között végzik. Az alkalmazott biológiai anyagokat és a páciens vérét alaposan előkészítik, ezeket különböző arányokban titrálják komplementtel, 0,5–0,05 ml e fehérje hozzáadásával. Az egyes kémcsövekben a reakció intenzitása szerint a reakció eredményeit megítéljük.

    Kinek ajánlják a tanulmányt?

    A szifilisz veszélyes nemi úton terjedő fertőzés. A fertőzés után az első tünetek gyakran észrevétlenek maradnak. A fekélyek a kórokozó behatolási helyein jelennek meg. A nőknél a hüvelyben, a méhnyakon, a végbélben vagy a szájban jelenhetnek meg. Nem kíséri kellemetlen érzés, fájdalom vagy specifikus váladékozás..

    Ha a kórokozó az ágyék, a szeméremajkak vagy a perineum bőrén található, akkor a szifilómák ugyanazokon a helyeken lokalizálódnak. A fekélyeket nem kíséri viszketés, nem hámozódnak le, és önmagukban nyom nélkül eltűnnek. A helyükön nem képződik heg vagy pigmentáció. Ezért az emberek nem mennek orvoshoz..

    Ezért törvényileg kötelező RW kötelező vérvizsgálatot vezettek be, amelyet a következő helyzetekben végeznek:

    • minden terhes nő a regisztrációkor, valamint röviddel a szülés előtt;
    • bármilyen invazív eljárás, műtéti műtét előtt, beleértve a minimálisan invazív beavatkozásokat is;
    • a munkaviszony alatti kötelező szakmai vizsga, valamint az éves vizsgák során.

    Terhes nőknél a vizsgálat a terhesség időtartamának közepén is elvégezhető, ami összefügg az antitestek képződésének sajátosságaival. Ha egy nő nem sokkal a terhesség előtt vagy a kezdeti szakaszban kapott treponemát, az immunrendszernek nem lesz ideje reagálni, az elemzés negatív lesz.

    A nőgyógyász RW-be irányítja Önt, ha egy vizsgált nő fájdalommentes fekélyt mutat a nemi szerveken, megnagyobbodott inguinalis nyirokcsomókat. Bőrgyógyász vagy terapeuta utal a vizsgálatra azoknál a betegeknél, akik panaszkodnak a megnagyobbodott nyirokcsomókra és a nemi szervek fekélyére, valamint a halvány kiütés megjelenésére a testen. Az önvizsgálat ajánlott alkalmi nemi érintkezés esetén, de legkorábban 3-4 héttel az állítólagos fertőzés után. Ennek oka az immunválasz sajátosságai és a treponema inkubációs periódusa..

    A szifilisz lefolyásának és az antitestek képződésének jellemzői

    A szifilisz nemi úton terjedő fertőzésekre utal, a fertőzés akkor fordul elő, amikor a beteg nemi traktusából származó váladék egészséges emberrel érintkezik. A treponema bevezetéséhez elegendő a bőrre kerülni, ezért az elsődleges elemek gyakran megjelennek a végbélnyílás körül, a száj nyálkahártyáján és más olyan helyeken, ahol érintkezés történt.

    Az inkubációs periódus egy héttől 190 napig tarthat, és az immunrendszer egyéni jellemzőitől függ. Megrövidül azoknál a nőknél, akik két forrásból egyidejűleg fertőződtek meg, de növekedhet, ha a kórokozók szaporodásának szakaszában egy másik fertőző betegség antibiotikumát kezelték.

    Attól a pillanattól kezdve, hogy megjelenik egy kemény állapot, kezdődik az elsődleges szifilisz. Átlagosan 6-7 hétig tart, és 2 periódusra oszlik:

    • szeronegatív - az RW vérvizsgálata, amelyet mikromódszerrel végeznek, és más típusú reakciók negatívak lesznek;
    • szeropozitív - a Wasserman-reakció pozitívvá válik, 3-4 héttel a kemény hám megjelenése után következik be.

    Ezért az elsődleges szifilisz vagy gyanús gyanúval rendelkező betegek vizsgálatakor a negatív RW ok arra, hogy néhány hét múlva megismételjük az elemzést. Visszatekintve lehetséges megállapítani a fertőzés felírását, nyomon követni a szexuális kapcsolatokat, vagy megtalálni azt a szexuális partnert, aki a fertőzés forrása lett.

    A szeronegatív és a szeropozitív periódusokra történő felosztást jelenleg ritkán alkalmazzák, mivel megjelentek a modern diagnosztikai módszerek, amelyekben a kórokozó, annak DNS-e vagy antitestjei a fertőzés után néhány héten belül kimutathatók.

    A másodlagos szifilisz az elsődleges kezelés után 6-7 héttel alakul ki. A kórokozó hematogén módon terjed a testben, befolyásolja a belső szerveket, és kiütés jelenik meg a bőrön. Ez az időszak három másikra oszlik:

    • korai vagy friss - elsődleges bőrkiütés, a testben már kifejlesztettek antitesteket;
    • visszatérő - a kiütés ismét megjelent az immunvédelem gyengülése miatt;
    • látens - a betegség látens formába kerül, amely külsőleg nem jelenik meg.

    A harmadlagos szifilisz a betegség kezelés nélküli sokéves fennállása után alakul ki. Manapság az antibiotikumok széles körű használata és az általános diagnosztika miatt nagyon ritka. Az idegrendszer, a csontok, a porc, a belső szervek károsodása jellemzi.

    Az antitestek képződése szakaszokban történik. A betegség korai stádiumában megjelenik az IgA, egy kemény chancre megjelenése után megtalálható az IgM, egy idő után pedig IgG. A betegség lefolyásának sajátossága, hogy a tercier szifiliszben az immunválasz nagyon gyengévé válik, és előfordulhat, hogy az RW elemzés során nem mutathatók ki antitestek.

    Hogyan készüljünk fel a vizsgálatra és mi befolyásolja az elemzés pontosságát

    A teszt elvégzése előtt be kell szereznie egy beutalót orvosától. A vizsgálatot nem anonim módon végzik, mivel a szifilisz olyan betegség, amely kötelező nemi közösülést és szexuális partnerek kezelését igényli. Elrettentő intézkedés a betegség terjedésének megállítására..

    Az elemzéshez nincs szükség különösebb előkészítésre. Az antitestek kimutatásához nem mindegy, hogy éhgyomorra veszik-e a vért, vagy sem, de az orvosok azt javasolják, hogy reggel ne egyenek, este pedig hagyják fel az alkoholt és a zsíros ételeket. Ez serkenti a májat, az epe felszabadulását a bél lumenébe és a vér lipidszintjének növekedését. Amikor megpróbálja megszerezni a szérumot, chyleis található, amely nem teszi lehetővé az elemzést.

    Terhesség alatt egy nőnek sem ajánlott enni, de vizet inni szabad. Ha az éhség állapotát rosszul tolerálják, akkor a véradás után cukorkát vagy csokoládét kell vinni a klinikára enni.

    Biológiai anyag gyűjtése

    A klasszikus RW teszthez vénás vért kell adni. Leggyakrabban a könyökhajlatból veszik, de más hozzáférhető edények is megengedettek. A vért, ahonnan a vért veszik, előzetesen egy szúrószorítóval préselik a szúrás helyén. Arra kérjük a beteget, hogy szorítsa össze és húzza ki az ökölt, hogy növelje az artériák véráramlását. A laboratóriumi asszisztens antiszeptikus oldattal kezeli a bőrt, és 5-10 ml vért szív be egy steril fecskendőbe.

    A további kutatásokhoz a szérumot a vérből nyerik; ezt a lehető leghamarabb el kell végezni, hogy a fibrinogén aktiválása és koaguláció ne következzen be. Ezért a képződött elemek kicsapódnak, és a kalciumionok hozzáadása után a fibrinogén inaktívvá válik. Ugyanakkor az antitestek nem tűnnek el sehol, ezért a biológiai anyag alkalmas elemzésre.

    A Wasserman-reakció eredményei

    Az RW elemzés körülbelül egy napot vesz igénybe. A modern kutatási módszerek, amelyek a készültség szempontjából fokozatosan felváltják a Wasserman-reakciót, közel azonosak. De más kutatási módszerek már az antitestek megjelenésének korai szakaszában pontos eredményt adnak, vagy lehetővé teszik a kórokozó DNS azonosítását, ezért az RW-n lévő vért ritkábban veszik fel.

    A műtét előtti rutinvizsgálat során figyelembe kell venni, hogy mennyi ideig érvényes az RW vérvizsgálata, hogy a kórházi kezelés napján ne kelljen megismételni a vizsgálatot és várni az eredményekre. A teszt 2 hónapig érvényes, valamint HIV és hepatitis tesztek. De azokban az esetekben, amikor az elemzést a műtét előtti felkészülés során nyújtják be, az orvosok azt javasolják, hogy egy hónappal a műtét vagy a manipuláció várható időpontja előtt vegyék be, hogy pozitív eredmény esetén lehetőség legyen a kezelés és az újbóli vizsgálat elvégzésére..

    Pozitív eredmény

    Az, hogy mennyi RW vérvizsgálatot végeznek, a laboratórium jellemzőitől függ, de leggyakrabban másnap készen áll az eredmény. A vizsgálat célja az M és G osztály összes immunoglobulinjának meghatározása, csak ebben az esetben pozitív eredményt kapunk. Összefoglalva, különböző értékeket találhat, amelyek meghatározzák a "+" jelek számát 1-től 4-ig. Minél több plusz, annál erősebb a Wasserman-reakció, annál több antitest van a páciensben.

    A dermatovenerológiai szakrendelésben, ahol kapcsolatba kell lépnie, ha az eredmény pozitív, további tanulmányokat írnak elő a diagnózis megerősítésére vagy tagadására. Ezért amikor a kezdeti vizsgálat során pozitív választ kap, ne essen pánikba, ez nem jelent betegséget.

    Az RW pozitív tesztje a következő körülmények között jelenik meg:

    • friss szifilissel vagy az elsődleges szeropozitív időszakban;
    • másodlagos szeropozitív szifilisz esetén, ha a fertőzés több mint 3 hónappal ezelőtt következett be;
    • tercier szifilissel a szeropozitív időszakban;
    • ha a kezelés óta kevesebb mint egy év telt el;
    • szerorezisztenciával a betegség kezelése után.

    Az RW vérvizsgálatát nemcsak a szifilisz diagnosztizálására használják, hanem antifoszfolipid szindrómára is. Ez egy olyan betegség, amely leggyakrabban nőknél fordul elő, és amelyet a foszfolipidek elleni antitestek képződése jellemez. Megtámadják az embriót, ami ismétlődő vetélésekhez és spontán korai vetélésekhez vezet. De az RW-n lévő vér adható az antifoszfolipid szindróma diagnosztizálásához, ha a szifilisz hiányát megerősítik.

    Negatív eredmény

    A laboratóriumi válaszlap azt jelezheti, hogy az eredmény negatív, ami azt jelenti, hogy nincs antitest. De, tekintettel a betegség patogenezisének sajátosságaira és az antitestképződés szakaszaira, egy ilyen következtetés nem mindig az egészségi állapot mutatója..

    Ha a tesztet a nemi közösülés utáni első 3-4 hétben végzi el, amely során fertőzés történhetett, a testben csak A osztályú immunglobulinok találhatók, amelyeket az RW teszt során nem észlelnek. A korai szeronegatív periódusban, amikor már a betegség első tünetei jelentkeznek, hiányzik a pozitív eredményhez szükséges teljes antitestkészlet is. Ezért a szifilisz gyanúja esetén, de a vizsgálat negatív eredménye néhány hét múlva további vizsgálatokat vagy újbóli vizsgálatot ír elő..

    Negatív eredmény lehet, ha egy személy a patológia tercier szakaszában alakult ki. Ebben az esetben a kár kifejezett jellemző jelei vannak:

    • idegrendszer;
    • az aorta és más nagy erek;
    • gerincvelő;
    • csontok és izmok;
    • nyálkahártyák;
    • felhám.

    Az ilyen betegek memóriában, figyelemben és gondolkodásban szenvednek. A tercier szifilisz diagnosztizálása a vizsgálati eredmények alapján nehéz.

    Hamis eredmény

    Felnőtteknél a pozitív RW-teszt nem mindig jelzi a fertőzést. Van egy hamis pozitív vizsgálat koncepciója, amely összefügg a keresztreaktív antitestek sajátosságával. A hamis RW a következő körülmények között figyelhető meg:

    • terhesség alatt;
    • diabetes mellitusban szenvedő betegeknél;
    • tuberkulózissal;
    • rákos betegeknél;
    • krónikus alkoholizmusban szenvedőknél;
    • fertőző mononukleózis esetén;
    • májkárosodás vírusos hepatitisszel;
    • tüdőgyulladással;
    • autoimmun betegségben szenvedő betegeknél;
    • drogfüggők;
    • köszvénygel;
    • enterovírusos fertőzés után;
    • a legutóbbi oltás után.

    Ezeket az állapotokat vagy betegségeket az immunrendszer feszültsége, nagyszámú antitest képződése jellemzi, amelyek képesek reagálni a komplementtel az RW elemzés során. Ezért a hamis pozitív eredménnyel rendelkező betegek további vizsgálatokat igényelnek. A pozitív RW-t kapott terhes nőket más módon tesztelik. Néha hamis pozitív eredményt kapnak, ha más típusú treponemával fertőznek, amelyek nem kapcsolódnak a szifilisz kórokozóihoz.

    Alternatív kutatási módszerek

    A Wasserman-reakciót elavult kutatási módszer olvassa, ezért ritkán alkalmazzák. Helyettesítették más, pontosabb módszerekkel, ezeket szokásosan RW 2 elemzésnek, vagy expressz módszernek hívják. Egyes klinikákon a formák továbbra is az RW szifilisz tesztet hívják, függetlenül az alkalmazott reakció típusától.

    A szifilitikus fertőzés kimutatásának minden módszere közvetlen, amelyek lehetővé teszik a halvány treponema kimutatását, és közvetettek, nem pedig a kórokozó elleni antitestek keresése alapján. A korai szakaszban, amikor az embernek fekélyes chancre vagy kiütése van a bőrön, mintát lehet kapni a kóros gócokból. A kutatás háromféleképpen végezhető:

    1. PCR - a módszer lehetővé teszi a kórokozó DNS detektálását, és a PCR valós idejű alkalmazásakor a mikroorganizmusok száma tükröződik. De a diagnózishoz elegendő megerősítést szerezni a mikroorganizmus jelenlétéről. A tercier szifiliszre hatástalan tanulmány.
    2. Sötétmező mikroszkópia - élő treponémák kimutatására irányul a vizsgált anyagban. A laboratóriumi asszisztens képes látni egy jellegzetes spirális mikrobiális sejtet, amely transzlációs mozgásokat végez, a módszer megbízhatósága 100%, de az eredmény nem fog működni, ha vér, genny van az anyagban vagy kifejezett gyulladás van a fókuszban.
    3. A RIT teszt egy drága biológiai teszt, amelyre a laboratóriumi állatokat egy beteg ember anyagával szennyezik, a teszt eredményére néhány hétig kell várni, ezért a vizsgálatot nem használják korai szűrésre..

    Az Orosz Föderáció Egészségügyi Minisztériumának megrendelésével a következő módszereket kell alkalmazni a szifilisz diagnosztizálására:

    1. A kicsapódás mikroreakciója a legegyszerűbb és leggyorsabb kutatási módszer, amelynek során a páciens vérében antitestekkel immunkomplexek képződnek, amelyek fehér pelyhek formájában kicsapódnak.
    2. Az RPHA közvetlen hemagglutinációs reakció, a módszer érzékenységi aránya 100%, de gyulladásos betegségek esetén hamis eredmény adódhat.
    3. RIF - jelölt antitestekkel végzett immunfluoreszcencia, a gyakorlatban ritkán használják a magas költségek miatt.
    4. RIBT - a halvány treponemák immobilizálása, drága tanulmány, ritka esetekben alkalmazzák.
    5. Az ELISA egy enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat, olcsó és nagyon specifikus diagnosztikai módszer, amely néha hamis eredményeket ad, ebben az esetben egy második vizsgálatot végeznek.

    A kötelező lista nem tartalmazza az immunblot tesztet. A diagnosztikai módszert kétes esetekben alkalmazzák, amikor mélyreható tanulmányra van szükség. Az eredmény eléréséhez hosszan tartó reakciók sorozatára van szükség, így az elemzés körülbelül 7 napot vesz igénybe.

    Az RW vérvizsgálattal diagnosztizálható a szifilisz és megkezdődhet a penicillint használó kezelés. Ez a vizsgálati módszer fokozatosan megszerzi a történelmi jelleget, helyét a modern és gyors expressz tesztek veszik át..